摘要
目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者在孕期补充维生素D3对其T淋巴细胞亚群的影响。方法选取2019年1—12月该院收治的孕周为24~28周的60例GDM患者作为研究对象,随机分为观察组和对照组。对照组采取合理控制饮食、运动和胰岛素降糖等常规治疗,观察组在对照组的基础上补充维生素D3400U/d,为期14d。同时选取30例健康孕妇作为健康组。常规血生化检测各组孕妇空腹血糖(FBG),使用同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱法测定25-羟基维生素D[25(OH)D]水平;采用酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4和IL-10水平;采用流式细胞术测定CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、Th1、Th2、Th1/Th2的细胞数。结果观察组治疗后25(OH)D水平明显高于对照组治疗后25(OH)D水平,差异有统计学意义(P<0.05)。补充维生素D3后,观察组、对照组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T淋巴细胞比例均显著高于同组治疗前,而CD8+T淋巴细胞比例均显著低于同组治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组、对照组治疗后Th1、Th1/Th2细胞比例均低于同组治疗前,Th2细胞数均高于同组治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组、对照组治疗后血清TNF-α、IFN-γ水平均显著低于同组治疗前,血清IL-4、IL-10水平均显著高于同组治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GDM患者补充维生素D3可有效调节CD4+/CD8+T淋巴细胞及Th1和Th2细胞比例,维持T淋巴细胞亚群平衡,防止免疫功能紊乱。
关键词:维生素D3;妊娠期糖尿病;T淋巴细胞;细胞因子
妊娠期糖尿病(GDM)指孕妇在妊娠中晚期由于母体碳水化合物代谢能力逐渐改变而失去对葡萄糖的耐受,从而导致血糖水平升高,呈现明显糖尿病症状的妊娠期并发症[1],可影响孕妇及子代的新陈代谢,且与不良妊娠结局相关。维生素D3是维持人体生命所必需的营养素,由于其受体存在于大多数组织中,它可影响2型糖尿病和妊娠期并发症的发生、发过程[2]。维生素D3通过刺激胰岛素分泌在糖耐量中发挥重要作用,且该作用与自身免疫和炎性反应密切相关。25-羟基维生素D[25(OH)D]是活性维生素D3的贮存形式和转运形式,可反映维生素D3水平。本研究拟选取GDM患者为研究对象,测定患者治疗前、后的维生素D3水平,以及患者T淋巴细胞亚群和相关炎症因子的表达,探讨孕期补充维生素D3对GDM患者T淋巴细胞亚群的影响。1资料与方法
1.1资料选取
2019年1—12月本院收治的孕周为24~28周的60例GDM患者作为研究对象,随机分为观察组和对照组各30例,纳入标准:(1)年龄18~35岁;(2)单胎初产孕妇;(3)血清25(OH)D<75nmol/L[3];(4)经75g葡萄糖负荷试验(OGTT),符合GDM诊断标准:空腹血糖(FBG)≥5.1mmol/L,服糖后1h血糖值≥10.0mmol/L,服糖后2h血糖值≥8.5mmol/L。另随机选取同期入院的健康孕妇(n=30)为健康组,纳入标准:(1)年龄18~35岁;(2)单胎初产孕妇;(3)血清25(OH)D>75nmol/L;(4)OGTT正常。排除标准:糖尿病、严重精神疾病、高血压、肝肾功能不全、内分泌疾病、心血管疾病及其他妊娠并发症患者。患者均知情且同意参与该研究,并经本院伦理委员会批准。各组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。1.2方法
1.2.1干预方法各组均进行常规定期产检,常规血生化检测观察FBG变化,饮食和运动谨遵医嘱。对照组采取合理控制饮食、运动和注射胰岛素等常规降糖治疗,根据患者体质量,计算每日所需热量(参考范围为125~145kJ/kg),科学调整患者的饮食结构,如碳水、蛋白及脂类摄入比例为2∶3∶3,并配合适当的有氧运动,检测患者的血糖控制情况。观察组则在对照组常规治疗的基础上口服补充维生素D3400U/d,为期14d。1.2.2处理及保存方法采集各组空腹外周静脉血4mL,37℃静置30min,4℃下以3000r/min离心20min,分离血清,标记后置于-80℃保存备用。1.2.3检测方法参考文献[4]建立的同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱法(ID-UPLC-MS/MS),通过建立标准曲线方程,测定并计算血清25(OH)D水平。使用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4和IL-10水平。分别选用抗CD3、CD4、CD8三色标记单克隆抗体并进行IFN-γ-FITC和IL-4-PE标记,采用流式细胞术测定CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、Th1、Th2、Th1/Th2的细胞数,分析结果,细胞数以百分比表示。1.3统计学处理
采用SPSS22.0软件对数据进行统计学处理,计量资料结果以x±s表示,进行单因素方差分析,采用q检验和χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。2结
果
2.1各组
25(OH)D和FBG水平比较观察组和对照组治疗前25(OH)D水平明显低于健康组,而FBG水平明显高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后25(OH)D水平明显高于对照组治疗后25(OH)D水平,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。2.2各组T淋巴细胞亚群比例测定结果比较
观察组、对照组治疗前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T淋巴细胞比例均明显低于健康组,而CD8+T淋巴细胞比例均明显高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。补充维生素D3后,观察组、对照组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T淋巴细胞比例均显著高于同组治疗前,而CD8+T淋巴细胞比例均显著低于同组治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T淋巴细胞比例高于对照组治疗后,而CD8+T淋巴细胞比例明显低于对照组治疗后,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。2.3各组Th1、Th2细胞比例测定结果比较
观察组、对照组治疗前Th1、Th1/Th2细胞比例均低于健康组,而Th2细胞数高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。补充维生素D3后,观察组、对照组治疗后Th1、Th1/Th2细胞比例均低于同组治疗前,Th2细胞数均高于同组治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后Th1、Th1/Th2细胞比例均低于对照组治疗后,而Th2细胞数高于对照组治疗后,差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。2.4各组TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10水平检测结果比较
观察组、对照组治疗前TNF-α、IL-4、IL-10水平明显高于健康组,而IFN-γ水平明显低于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。补充维生素D3后,观察组、对照组治疗后血清TNF-α、IFN-γ水平均显著低于同组治疗前,血清IL-4、IL-10水平均显著高于同组治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后血清TNF-α、IFN-γ水平均明显低于对照组治疗后,而血清IL-4、IL-10水平均明显高于对照组治疗后,差异有统计学意义(P<0.05)。见表5。讨
论
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来源:检验医学与临床
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